期刊简介

               本刊是中华人民共和国卫生部主管,中国性病艾滋病防治协会主办,专门介绍国内外艾滋病性病预防与控制最新动态,科研成果和有关信息的公开性的学术性刊物。1995年创刊以来,为中国的艾滋病性病预防工作者,管理者提供了大量的信息,成为本领域内唯一的不可缺少的刊物,深受广大读者欢迎,读者群遍及全国各个领域的部门,编委会为全国本领域内的知名专家组成。                

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  • 杂志名称:中国艾滋病性病杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中国性病艾滋病防治协会
  • 国际刊号:1672-5662
  • 国内刊号:11-4818/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
中国艾滋病性病杂志2011年第06期

实时相对定量反转录PCR检测小鼠阴道黏膜炎症因子的表达

李亮助;杨瑜;袁松华;贲银银;徐建青;张晓燕

关键词:实时相对定量反转录聚合酶链式反应, 阴道黏膜, 炎症因子, 安全性评价
摘要:目的 建立实时相对定量反转录聚合酶链反应(real-time RQ RT-PCR)方法,能快速准确地检测各种炎症因子在阴道黏膜的转录表达情况,从而评价包括杀微生物剂在内的生殖道或直肠黏膜用候选药物的刺激毒性.方法 以Eppendorf Mastercycler ep realplex实时荧光定量PCR仪为检测平台,选择小鼠β-actin基因为内参,建立基于SYBR Green Ⅰ荧光染料的real-time PCR检测方法,对白介素2(Interleukin 2,IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor α,TNF-α)、γ干扰素(Interferon γ,IFN-γ)等炎症因子在生殖道黏膜的mRNA转录水平,同时进行检测,并用2--⊿⊿Ct方法计算实验组小鼠目的基因相对于空白组小鼠的表达差异情况.用微量样本多指标流式蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)对结果进行验证.结果 使用real-time RQ RT-PCR能对小鼠阴道黏膜炎症因子的表达情况进行快速检测,结果与CBA检测结果相吻合.结论 该方法快速、灵敏、特异性强、价格低廉、高通量.可用于杀微生物剂等生殖道或直肠黏膜用候选药物的临床前安全性评价工作.